二磷酸腺苷（ADP）含量試劑盒HPLC法

二磷酸腺苷（ADP）含量試劑盒HPLC法

規(guī)格 : 50T/100T

測(cè)試方法：高效液相色譜法/HPLC

測(cè)定意義
二磷酸腺苷（ADP）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，是描述細(xì)胞能量代謝狀態(tài)的主要參數(shù)。測(cè)定ADP含量并且計(jì)算能荷，能夠反映能量代謝狀態(tài)。當(dāng)一摩爾ATP分子的磷酸根水解斷裂時(shí)，會(huì)產(chǎn)生一摩爾二磷酸腺苷分子，一摩爾磷酸根（Pi），并釋放出7.3千卡（kcal)的能量。ADP存在于血小板細(xì)胞內(nèi)的高密度顆粒內(nèi)，當(dāng)血小板發(fā)生凝聚反應(yīng)時(shí)被釋放，ADP通過(guò)血小板上的ADP受體對(duì)血小板的形狀及生物學(xué)行為產(chǎn)生影響，進(jìn)一步加速血小板的凝聚過(guò)程。

測(cè)定原理
ADP在254 nm下有吸收峰，可以利用高效液相色譜法測(cè)定其含量。

高效液相色譜法簡(jiǎn)介：

高效液相色譜法（High Performance Liquid Chromatography HPLC）又稱“高壓液相色譜”、“高速液相色譜”、“高分離度液相色譜”、“近代柱色譜”等。高效液相色譜是色譜法的一個(gè)重要分支，以液體為流動(dòng)相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析。該方法已成為化學(xué)、醫(yī)學(xué)、工業(yè)、農(nóng)學(xué)、商檢和法檢等學(xué)科領(lǐng)域中重要的分離分析技術(shù)應(yīng)用 。

高效液相色譜法具有“四高一廣”的特點(diǎn)：

①高壓：流動(dòng)相為液體，流經(jīng)色譜柱時(shí)，受到的阻力較大，為了能迅速通過(guò)色譜柱，必須對(duì)載液加高壓。

②高速：分析速度快、載液流速快，較經(jīng)典液體色譜法速度快得多，通常分析一個(gè)樣品在15～30分鐘，有些樣品甚至在5分鐘內(nèi)即可完成，一般小于1小時(shí)。

③高效：分離效能高。可選擇固定相和流動(dòng)相以達(dá)到很好的分離效果，比工業(yè)精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。

④高靈敏度：紫外檢測(cè)器可達(dá)0.01ng，進(jìn)樣量在μL數(shù)量級(jí)。

⑤應(yīng)用范圍廣：百分之七十以上的有機(jī)化合物可用高效液相色譜分析，特別是高沸點(diǎn)、大分子、強(qiáng)極性、熱穩(wěn)定性差化合物的分離分析，顯示出優(yōu)勢(shì)。

⑥柱子可反復(fù)使用：用一根柱子可分離不同化合物

⑦樣品量少、容易回收：樣品經(jīng)過(guò)色譜柱后不被破壞，可以收集單一組分或做制備。

此外高效液相色譜還有色譜柱可反復(fù)使用、樣品不被破壞、易回收等優(yōu)點(diǎn)。

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